Prueba de PCR en Cirrosis Hepática avanzada…
1.Tema: La detección de ADN tumoral circulante en pacientes con
carcinoma hepatocelular mediante PCR digital de gotas es factible y refleja la
heterogeneidad intratumoral
2.Objetivo:
Detectar
ctDNA en pacientes con carcinoma hepatocelular (CHC) usando ddPCR.
•ADN
tumoral circulante (ADNc) se reconoce cada vez más como biopsia líquida para
perfilar el genoma del tumor.
3.Muestra
biológica: 1 ml de muestra de plasma preoperatoria
4.Tipo
de ácido nucleico: ADN circulantes libres de células (ADNc)
5.Gen a amplificar: Cuatro
sitios mutantes dentro de tres genes
•TP53 (c.747G> T)
•TERT (c.1-124C> T)
•CTNNB1
(c.121A> G) y (c.133T> C)
6.Tipo
de PCR: PCR digital de gotas (ddPCR) usando el kit QIAamp
7. Extracción
del ácido nucleico: El cDNA se extrajo usando el kit de ácido
nucleico circulante QIAamp (QIAGEN, Hilden, Alemania) con el colector de vacío
QIAvac 24 Plus, de acuerdo con las instrucciones del fabricante.
8. Visualización: Lectura
de amplitud de fluorescencia para todas las gotas en cada pocillo
9. Análisis
|
|
Concordancia |
Especificidad |
Sensibilidad |
|
TP53 |
87,2% |
73,3% |
94,4% |
|
TERT |
84,9% |
69,1% |
93,4% |
|
CTNNB1 |
87,8% |
74,5% |
94,7% |
Ok 1
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